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非編碼RNA也有功能:能調(diào)控免疫系統(tǒng)的“進(jìn)”與“退”

  • 2018年5月8日 FanTianQing來源:新浪新聞 601 34
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《細(xì)胞》雜志近日刊登中國工程院院士曹雪濤團(tuán)隊的研究論文,他們發(fā)現(xiàn)一種全新非編碼RNA分子。該分子能夠調(diào)控免疫系統(tǒng)的“進(jìn)”與“退”,這是此前學(xué)術(shù)界從未認(rèn)識和證明的。

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什么是RNA?RNA有什么用?

在人類基因組中95%的基因并不編碼蛋白質(zhì),其他物種也有大量的非編碼基因。這些DNA不會被編碼成蛋白質(zhì),卻又會轉(zhuǎn)錄出非編碼RNA,它們對生命活動起什么作用?是進(jìn)化的冗余還是神秘的緩存?

《細(xì)胞》雜志近日刊登中國工程院院士曹雪濤團(tuán)隊的研究論文,他們發(fā)現(xiàn)一種全新非編碼RNA分子。該分子能夠調(diào)控免疫系統(tǒng)的“進(jìn)”與“退”,這是此前學(xué)術(shù)界從未認(rèn)識和證明的。

“由于長鏈非編碼RNA(lncRNA)豐度低,業(yè)界對其功能爭議很大?!闭憬髮W(xué)生命科學(xué)研究院教授徐平龍在此前接受采訪時評價道,但此次發(fā)表的研究嚴(yán)謹(jǐn)?shù)罔b定了所發(fā)現(xiàn)的一種全新lncRNA是有功能的,即能夠進(jìn)行免疫調(diào)控,而曹雪濤院士正是這一機(jī)制的主要開拓者之一。

大海撈針 從浩淼細(xì)胞中層層篩選而出

細(xì)胞雖小,卻瀚如干坤。尋找一個不知道存不存在的RNA分子,如大海撈針。

到哪里找線索?病毒感染給了曹雪濤啟示。談到為什么會從病毒這個“敵人”的角度考慮。曹雪濤講道:“我們中國文化講,陰中有陽、陽中有陰,這是外國人很難理解的。這一哲理指導(dǎo)我們對免疫系統(tǒng)的理解就是,激活和抑制很可能會交融在一處,那么我們就從這個‘交融點’突破解題。”

既然體內(nèi)蛋白能夠識別外來的病毒RNA,能不能識別體內(nèi)自身RNA呢?

科學(xué)界大部分認(rèn)為不能?!懊庖呦到y(tǒng)擁有識別‘自我’‘非我’的能力,就好像邊境衛(wèi)士,對外來的侵害反應(yīng)敏感,對轄內(nèi)‘居民’熟視無睹?!辈苎菏繄F(tuán)隊成員之一、中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所教授姜明紅說,“但是曹老師并不這么看,他說,究竟是不是熟視無睹,你要證明才行?!?/p>

在中國傳統(tǒng)哲理思想的指引下,曹雪濤鎖定了一個已知的關(guān)鍵蛋白——“RIG-I”,求證這個能與病毒RNA結(jié)合的蛋白,會不會和體內(nèi)自身的RNA分子結(jié)合。

RIG-I很像一個分子水平的“老鼠夾子”,2011年有科學(xué)家解析了這個蛋白的分子結(jié)構(gòu),發(fā)現(xiàn)“老鼠(病毒RNA)”沒來的時候,夾子合著,兩頭的結(jié)構(gòu)域相互作用,蛋白處于“閉合”狀態(tài);一旦“老鼠”來了,與夾子的一頭結(jié)合,另一頭就會“彈開”,蛋白遂處于激活狀態(tài)。而這樣的構(gòu)象變化,會引發(fā)細(xì)胞合成出關(guān)鍵的抗病毒分子——干擾素,干擾素分泌后被周圍細(xì)胞接受,引發(fā)抗病毒的“連鎖反應(yīng)”。

研究團(tuán)隊通過紫外加強(qiáng)RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀(UV-RIP)的方法,將“老鼠夾子”和它獵捕的“老鼠”同時從細(xì)胞中分離出來。隨后通過蛋白質(zhì)變性等方法,把“老鼠夾子”過濾掉,就獲得與RIG-I結(jié)合的所有RNA。

夾子“釣”上來的所有RNA中,有沒有未被發(fā)現(xiàn)的有功能的lncRNA呢?

將“撈針”的范圍鎖定夾子“釣”上來的RNA后,團(tuán)隊又通過設(shè)計對應(yīng)的干擾實驗繼續(xù)縮小范圍,即看究竟哪個RNA被封殺之后,免疫活動不再被抑制。功能篩選幫助團(tuán)隊鎖定了一批備選者并列出“排名”。排名靠前的RNA分子,且與特定信號通路相關(guān)的lnc-Lsm3b被鎖定,一個新的RNA分子從浩淼的小鼠巨噬細(xì)胞中經(jīng)過層層篩選被“打撈”上來,并獲得了確切的序列。

團(tuán)隊后續(xù)開展了多角度的證明工作,如通過干擾、敲除、過度表達(dá)等技術(shù),反復(fù)證明lnc-Lsm3b能夠在病毒感染的細(xì)胞中,通過“分子誘餌”的方式鎖定RIG-I,使其不與病毒RNA結(jié)合。

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